骨髓间充质干细胞研究进展(一)

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骨髓间充质干细胞研究进展一

【摘要】骨髓间充质干细胞是干细胞领域的研究热点之一。虽然近几年来有关间充质干细

胞的研究已取得了很大进展，但仍有很多问题有待进一步解决。本文主要对间充质干细胞

的生物学特性、以及免疫耐受性、分化和促修复、间充质干细胞的标记等问题进行综述。

【关键词】骨髓间充质干细胞分化标记

骨髓间充质干细胞 ，是骨髓内除造血干

细胞，之外的另一类干细胞，是骨髓造血微环境的重要组成部

分，在体内外均具有支持和调控造血的作用。因其比较容易贴壁和形成成纤维样的克隆，

因此也称成纤维细胞集落形成单位， 。又由于它们来自

骨髓的支持结构，并作为滋养层支持造血干细胞的生长，因此也有人称其为骨髓基质细胞

，。

!骨髓  的生物学特性

不同物种的  体外培养的形态学特征大致相同，主要表现为梭形、纺锤形，少数为多

角形。目前， 的分离方法主要有以下几种：!全骨髓培养，是将无菌抽取的骨髓加

入培养液制成细胞悬液并培养，原代培养培养物以造血细胞成分居多，为利于  的贴

壁生长，可采用 "# 和胎牛血清培养。 对营养要求高，胎牛血清终浓度为 !$％～

%$％，有人认为红细胞会随着换液而逐渐被自然去除，对  影响不大。细胞融合后以

!&% 比例传代，'～(天换液一次〔!〕；%离心培养法，是根据骨髓中细胞成分比重的不同，

采用离心分离法提取单核细胞进行培养。在新鲜无菌的骨髓抽取物中加入抗凝培养液稀释

!)$$～%$$$／ 离心 %$～'$，采集交界处的单核细胞层，* 洗涤 %～'次后，加入

培养液接种培养；'细胞表面分子标记分选法，主要是根据  的细胞表面分子特征来

分离。一般采用流式细胞仪、免疫磁珠或免疫沉积法来进行分选。但由于目前仍未找到

 特异性的细胞表面标记物〔%〕该法较少采用。影响  扩增的主要因素：!血

清：血清对大量扩增  起着重要的作用，不同浓度的血清对培养  纯度的影响亦

较大，常用!０+～%$+的胎牛血清培养 ,%接种密度： 的体外扩增速度与其

接种密度也有关，一般认为较低密度种植有益于增殖。高密度接种后细胞生长较慢其原因

可能是由于细胞间的接触抑制，或细胞释放到培养基中的因子影响了  的生长,'细

胞因子：一些细胞因子对于维持  增殖和未分化状态亦十分重要,(动物种属：一般

认为  的生长特性相似，但也有资料显示  生长特点有种属差异〔'〕。

%间充质干细胞移植后的免疫耐受性

在移植治疗中，一般情况下，移植物会引起宿主的免疫排斥反应。但对于间充质干细胞来

说却不是这样。实验表明间充质干细胞可以抑制-细胞的增殖从而导致免疫耐受〔(～

.〕。-细胞与其它细胞的相互作用可以通过混和淋巴细胞反应来观察。被标记的 -细胞与

其它细胞混合后，如果可以引起-细胞的免疫反应，则可以观察到-细胞的增殖现象。但

当把间充质干细胞与-细胞混合后却观察不到 -细胞的增殖反应，而且这种现象并不是由

于-细胞凋亡或其它的有害作用引起的。因为在去除间充质干细胞后，这些 -细胞仍然可

以对其它物质进行反应。此外，使用趋化膜将两种细胞分隔开培养后，间充质干细胞对 -

细胞的抑制作用依然存在，表明这种抑制作用可能通过某种可溶性的小分子起作用。另外

除了未分化的间充质干细胞可以抑制-细胞的增殖外，实验也表明，随着干细胞的分化，

其抗原性并没有随之增加〔/〕。总之，间充质干细胞可以通过某种机制抑制-细胞的成熟

来逃避免疫系统的清除。也暗示间充质干细胞可能在机体免疫系统的调节及骨髓中各种干

细胞未分化状态的维持方面起作用。

'促组织修复和细胞分化

骨髓间充质干细胞是存在于骨髓组织中的一类成体干细胞，0，在

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摘要：

骨髓间充质干细胞研究进展摘要骨髓间充质干细胞（BMSCs）是干细胞领域的研究热点。BMSCs是骨髓造血微环境重要组成部分在体内外均支持和调控造血。其生物学特性表现为不同物种体外培养形态相似主要为梭形等分离方法有全骨髓培养、离心培养法、细胞表面分子标记分选法扩增受血清、接种密度、细胞因子、动物种属等因素影响。间充质干细胞移植后具免疫耐受性可抑制T细胞增殖机制可能是通过可溶性小分子且分化后抗原性未增加。BMSCs具有强大分化潜能可跨系、跨胚层分化为组织修复提供可能但实验结果存在差异。BMSCs标记常用BrdU标记法与HTDR标记结果相关性良好具有无放射性污染等优点。目前BMSCs是组织工程研究热点因取材方便、易培养、免疫原性弱等优点是理想的种子细胞异体移植也展现出一定效果。

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