小鼠肿瘤坏死因子αTNF-α酶联免疫分析ELISA
2025-10-17
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小鼠肿瘤坏死因子 α(TNF-α)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用
目的:本试剂盒用于测小鼠血清,血浆及相关液体样本中肿瘤坏死因子
α(TNF-α)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠肿瘤坏死因子 α(TNF-α)水平。用纯化的小
鼠肿瘤坏死因子 α(TNF-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
肿瘤坏死因子 α(TNF-α),再与 HRP 标记的肿瘤坏死因子 α(TNF-α)抗体结合,形成抗体-抗
原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成
蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子 α(TNF-α)
呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小
鼠肿瘤坏死因子 α(TNF-α)浓度。
试剂盒组成:
试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存
说明书 1份1份
封板膜 2片(48)2片(96)
密封袋 1个1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品:2700ng/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶2-8℃保存
标准品稀释液 1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶标试剂 3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
样品稀释液 3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
显色剂 A液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
显色剂 B液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
终止液 3ml×1 瓶6ml×1 瓶2-8℃保存
浓缩洗涤液 (20ml×20 倍)×1 瓶 (20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存
注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最
好控制在 5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD
值大于标准品孔第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,
计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
摘要:
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小鼠肿瘤坏死因子TNF酶联免疫分析(ELISA)试剂盒摘要本试剂盒专供研究使用用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中TNF含量。其原理是应用双抗体夹心法通过纯化抗体包被微孔板加入TNF与HRP标记抗体结合形成复合物后洗涤加底物显色颜色深浅与TNF含量正相关用酶标仪测定吸光度后通过标准曲线计算浓度。试剂盒分48孔和96孔配置含封板膜、密封袋、酶标包被板等多种组件均需28保存。使用时试剂盒需室温平衡酶标板开封后未用完的板条应密封保存洗涤液加温助溶加样器控制误差同时做标准曲线封板膜一次性使用底物避光结果以酶标仪读数为准废弃物按传染物处理。操作包括标准品稀释加样、加样、温育、洗涤、加酶、显色、终止、测定等步骤。样本处理包括血清、血浆、尿液等多种类型。该试剂盒样品线性回归R值095以上批内与批间差分别小于9和11检测范围1002000ngL有效期6个月。
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