小鼠IL0免疫组化试剂盒

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小鼠 IL-10 免疫组化试剂盒

该试剂盒以 HRP 标记的链霉亲和素复合物（ HRP Streptavidin

Conjugate，HRP-SA）为基础，可用于检测细胞、组织内的特异性 IL-10 抗原。

该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、定性定位准确、背景清晰。在所用的 IL-

10 一抗与相应靶抗原结合后，用生物化二抗与一抗特异性结合，最后加入 HRP-

SA，形成抗原—特异一抗—生物素化二抗—HRP-SA 复合物，显微镜下观察成像。

试剂盒所含试剂：

试剂 A 通透液：0.1% Triton-X 100 10 mL（选用）

试剂 B 封闭缓冲液（封闭用） 20 mL

试剂 C （原装进口分装）已稀释的即用型 IL-10 一抗（2.5ml）

试剂 D （原装进口分装）生物素化羊抗兔 IgG 1 支

（浓度 1.5 mg/mL，稀释比为 1:300~1:500）50 μL+抗体稀释液 20ml

试剂 E HRP-SA 复合物 1 支（浓度 1 μM，稀释比 1:50~1:200）100 μL

试剂 F DAB 显色液 5ml

用户自备试剂：

1． 10mM TBS（pH7.2~7.4）

三羟基氨基甲烷 1.21g

氯化钠 7.6g

加蒸馏水 800mL，浓盐酸调 pH 值至 7.2~7.4，最后定容至 1000mL

TBS-T：TBS+Tween 20（0.05%体积比）

2．抗原修复液（依检测抗原不同而选择不同的修复液）

10mM pH6.0 柠檬酸缓冲液

柠檬酸 0.38g

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摘要：

小鼠IL10免疫组化试剂盒基于HRP标记的链霉亲和素复合物用于检测细胞、组织内的特异性IL10抗原具有灵敏度高、特异性强等特点。试剂盒包含通透液、封闭缓冲液、即用型IL10一抗、生物素化羊抗兔IgG、HRPSA复合物及DAB显色液等用户需自备TBS、TBST、抗原修复液等试剂。实验步骤包括烤片、脱蜡、水化、抗原修复（可选高压、微波或酶消化修复法）、封闭、加一抗、洗涤、加二抗、再次洗涤、封闭、加HRPSA、洗涤、显色、复染、封片及观察成像。注意事项包括修复后缓冲液须自然冷却、缓冲液量要充足、微量浓缩液用前应离心、封片前充分洗涤等。附1提供了常用抗原修复方法包括酶消化、微波、直接高压及隔水式高压抗原修复法。

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