人骨保护素OPG酶联免疫分析
2025-10-17
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人骨保护素(OPG)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
80pg/ml-2000pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中骨保护素(OPG)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人骨保护素(OPG)水平。用纯化的人骨保护
素(OPG)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入骨保护素
(OPG),再与 HRP 标记的骨保护素(OPG)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,
经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转
化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的骨保护素(OPG)呈正相关。用酶标仪在 450nm
波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人骨保护素(OPG)浓度。
试剂盒组成
130 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶7终止液 6ml×1 瓶
2酶标试剂 6ml×1 瓶8标 准 品 ( 4000pg/
ml)
0.5ml×1 瓶
3酶标包被板 12 孔×8 条9标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4样品稀释液 6ml×1 瓶10 说明书 1份
5显色剂 A液6ml×1 瓶11 封板膜 2张
6显色剂 B液6ml×1/瓶12 密封袋 1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行
稀释。
2000pg/ml 5号标准品 150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
1000pg/ml 4号标准品 150μl 的5号标准品加入 150μl 标准品稀释液
500pg/ml 3号标准品 150μl 的4号标准品加入 150μl 标准品稀释液
250pg/ml 2号标准品 150μl 的3号标准品加入 150μl 标准品稀释液
125pg/ml 1号标准品 150μl 的2号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准
孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释
液40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5倍)。加样将样品加于酶标板
孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
摘要:
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人骨保护素(OPG)酶联免疫分析试剂盒专供研究使用用于测定人血清、血浆等样本中的OPG含量。其检测范围为96T80pgml2000pgml实验原理基于双抗体夹心法。用纯化OPG抗体包被微孔板依次加入样本和HRP标记的OPG抗体形成复合物洗涤后加TMB显色颜色深浅与OPG含量正相关通过酶标仪测定吸光度计算OPG浓度。试剂盒含浓缩洗涤液、终止液、酶标试剂、标准品等组件。操作时需先稀释标准品再依次加样、温育、洗涤、加酶、显色、终止最后测定吸光度。计算时根据标准曲线或回归方程式得出样品浓度并乘以稀释倍数。使用注意事项包括:取出试剂盒后需室温平衡;浓洗涤液结晶可水浴助溶;加样需准确迅速;每次测定需做标准曲线;封板膜一次性使用;底物避光保存;严格按说明书操作;所有废弃物按传染物处理;不同批号组分不得混用。试剂盒需28保存有效期6个月。
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