苦参碱对肝癌细胞增殖以及其细胞自噬的影响

2025-10-16 999+ 19KB 3 页海报

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 [摘要] 目的探索苦参碱对肝癌 HepG2 细胞增殖及其细胞自噬的影响,

为临床探索有效的肝癌综合治疗方案提供实验依据。方法采用 MTT 法和流式细

胞仪检测肝癌 HepG2 细胞增殖抑制率及其细胞周期的变化;荧光显微镜定性观察

肝癌细胞自噬情况。结果苦参碱抑制肝癌 HepG2 细胞的增殖,且随苦参碱浓度

的增加和时间的延长,肝癌 HepG2 细胞的抑制率增加(P < )。流式细胞仪检测示:

苦参碱组细胞周期中 G1 期细胞增多,S 期细胞减少(P < )。荧光显微镜检测:肝

癌 HepG2 细胞质中有自噬体形成,且随苦参碱浓度的增加,自噬体越来越多。结

论苦参碱对肝癌 HepG2 细胞增殖有一定的抑制作用,苦参碱抑制肝癌细胞的同

时诱导了自噬的产生。苦参碱诱导肝癌 HepG2 细胞自噬多发生在细胞周期的 G1

期。

 [关键词] 苦参碱;肝癌细胞;自噬;细胞周期

 [中图分类号] [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(20XX)03(a)-

0011-03

 在中国传统医药中,苦参碱是一种从苦参、山豆根中提取的生物碱,其分

子式为 C15H24N2O。而苦参碱早被广泛用于治疗病毒性肝炎、肝纤维化、心律失

常等疾病。国内外研究表明:无论是在体内还是体外,苦参碱具有较高的抗肿瘤活

性。它可以抑制肿瘤增殖、诱导分化、诱导凋亡、抗转移等作用,同时又具有免疫

调节、升高白细胞、缓解癌痛等许多常规化疗药物所不具备的优势。此外,研究发

现苦参碱诱导了大鼠 C6 胶质瘤细胞的自噬。而自噬与肿瘤关系密切,同样在抑

制肿瘤中起着非常重要的作用[4-5]。细胞自噬在辅助化疗药物治疗恶性肿瘤方

面起着非常重要的作用。本实验通过研究不同浓度的苦参碱作用于肝癌 HepG2

细胞,探讨苦参碱对肝癌 HepG2 细胞细胞周期以及细胞自噬的影响,为临床化疗

药物治疗肝癌提供理论基础。

 1 资料与方法

 一般资料

 肝癌 HepG2 细胞由北京协和医学院提供。苦参碱(Matrine,广州白云山

明兴制药有限公司)、DMEM g/L Glu(Gibco 公司)、PBS液、胎牛血清(美国 Sigma

公司)、单丹磺酞戊二胺(MDC)(美国 Sigma公司)、二甲基亚砜(DMSO)、荧光显微

镜(日本 OlympuS公司)、CO2 培养箱、离心机(北京医用离心机厂)、流式细胞仪

(美国BD 公司,型号:FACSCalibur)、电热恒温培养箱(河北省黄石市医疗器件

厂)等。

 方法

 细胞培养及处理将肝癌 HepG2 细胞培养在含10%胎牛血清的DMEM 培

养液的培养瓶中,在 37℃、5%CO2、饱和湿度下常规培养。显微镜下观察细胞贴壁

达 80%时,用胰酶消化处理,取对数期细胞进行实验。

 MTT 法肝癌 HepG2 细胞用%胰酶处理制成单细胞悬液,以每孔约 104 个

细胞接,种于 96孔板(每孔 100 μL)。分别加入不同浓度的苦参碱溶液,使其终

浓度为、、 mg/mL,每个浓度设三个孔。然后在加培养液 100 μL,每孔总体积为

200 μL,同时设定空白孔及对照孔。然后放回 CO2 箱中培养 24、36、48 h。分别在

各个时间段结束前 4 h加入MTT(5 mg/mL)溶液 10 μL,反应 4 h 离心弃上清液。

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标签： #肝癌

摘要：

苦参碱对肝癌细胞增殖及细胞自噬的影响摘要本文旨在探索苦参碱对肝癌HepG2细胞增殖及其细胞自噬的影响为临床治疗提供实验依据。研究采用MTT法和流式细胞仪检测HepG2细胞增殖抑制率及细胞周期变化并用荧光显微镜观察细胞自噬情况。结果显示苦参碱显著抑制肝癌HepG2细胞增殖且随浓度增加和时间延长抑制率上升。流式细胞仪检测发现苦参碱使G1期细胞增多S期细胞减少表明其将细胞周期阻滞在G1期。荧光显微镜检测到HepG2细胞质中自噬体随苦参碱浓度增加而增多。研究表明苦参碱对人肝癌HepG2细胞有抑制作用且诱导了自噬产生多发生在G1期。本文为细胞周期与肿瘤增殖、分化等关系及临床治疗肝癌提供了理论基础。

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