流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识(2019)

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流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识

（2019 完整版）

　　流式细胞术（flow cytometry,FCM）是一种对单细胞或生物颗粒进

行多参数、定量分析的技术，具有速度快、精度高、准确性好等优点。

目前 FCM 广泛应用于临床医学，在疾病的预防、诊断、治疗及预后判断

中具有重要作用。但是淋巴细胞亚群在不同年龄阶段有不同的正常参考

范围[1]，并且其结果受多种因素的影响，造成临床判读相对困难。为科

学合理应用 FCM 协助诊治儿科疾病，"流式细胞术分析外周血淋巴细胞

亚群在儿科的临床应用共识"在多个学术组织的协作下于 2016 年正式发

表[2]。该共识提高了医务工作者对 FCM 在儿科临床应用的认识，促进了

临床诊疗水平的提高。医学技术飞速发展，FCM 的应用也有了一定的进

展。为适应医学发展和临床应用的需要，多个学术组织的专家讨论撰写

了"流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识

（2019 版）"。

一、淋巴细胞亚群分析常规检测项目和报告内容

　　淋巴细胞亚群分析是临床开展最多的 FCM 检测项目，是指借助各种

荧光染料标记的单克隆抗体测定各类淋巴细胞胞膜或胞内独特的分化抗

原（cluster of differentiation,CD），对淋巴细胞的各个亚群进行分析。

原国家卫生部发布的 FCM 检测外周血淋巴细胞亚群指南（WS/T 360－

2011）对于规范 FCM 在外周血淋巴细胞亚群分析中的应用具有重要指导

意义。检测过程需注意标本采集和运输、免疫荧光染色、检测和分析、

结果报告和审核等方面。

　　常规检测的淋巴细胞亚群包括 T 细胞（CD3+）、B 细胞（CD3－

CD19+）和 NK 细胞（CD3－CD16+CD56+）；T 细胞又分为 2 个亚群：

辅助性 T 细胞（CD3+CD4+）和杀伤性 T 细胞（CD3+CD8+）。淋巴

细胞亚群分析报告应提供各个亚群细胞的相对计数（百分比）和绝对计

数。FCM 可以直接测得各淋巴细胞亚群的相对计数。仅检测淋巴细胞亚

群相对计数，对于判断患儿免疫状态存在较大局限。有些疾病会导致

T、B、NK 细胞同时增多或减少，如噬血细胞综合征可出现 3 种淋巴细胞

同时减少，仅检测相对计数则无法发现异常；如对于地中海热患儿，评

估其 T 细胞绝对计数，有助于判断疾病严重程度，仅检测相对计数则会

影响判断[3]。

　　绝对计数有 2 种方法：（1）单平台法采用定量微球，直接获得淋巴

细胞亚群绝对计数；（2）双平台法采用 FCM 测定的淋巴细胞百分比，

结合血常规中总淋巴细胞数量，计算得到各亚群淋巴细胞的绝对计数。

建议采用单平台方法进行绝对计数检测，以减少室间变异，并避免多台

仪器间的系统误差。

二、标本采集和运输

　　首选乙二胺四乙酸盐抗凝管采集外周静脉血标本，肝素钠或枸橼酸

钠抗凝血也可用于检测，但如标本同时进行白细胞计数分类，则应选择

乙二胺四乙酸作为抗凝剂。标本采集后应立即检测，不能立即检测的标

本应置室温保存[4]，并在 24 h内检测。

三、检测对象的选择

　　（一）明确存在免疫功能受损者——原发性免疫缺陷病（primary

immunodeficiency diseases,PID）

　　PID 是一组先天性或遗传性因素所致的免疫器官、组织、细胞或分子

缺陷，导致机体免疫功能不全的疾病。2017年国际免疫学会联合会

（international union of immunological societies，IUIS）将 PID 分

为 9 类共 354 种疾病[5]。

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摘要：

《流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识（2019完整版）》摘要流式细胞术（FCM）可对单细胞等进行多参数、定量分析在临床医学中应用广泛。但淋巴细胞亚群正常参考范围因年龄而异且结果受多种因素影响判读较难。2016年相关共识提高了医务工作者对其在儿科临床应用的认识2019年专家又讨论撰写新版共识。淋巴细胞亚群分析是常见FCM检测项目常规检测包括T、B、NK细胞及T细胞亚群报告应提供相对和绝对计数建议用单平台法进行绝对计数检测。标本采集首选乙二胺四乙酸盐抗凝管采集后应立即检测不能立即检测的标本应置室温保存并在24h内检测。检测对象包括明确或可能存在免疫功能受损者以及其他特殊情况。结果判读应结合相对和绝对计数通过3个基本公式判断基本数据CD3、CD19、CD16、CD56等数值异常可提示检测系统或淋巴细胞亚群异常。

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