病毒和病毒成份的提纯
第十四章摘要:病毒和病毒成份的提纯病毒提纯是病毒学研究的重要前提旨在去除宿主细胞组分等非病毒杂质获取高纯度、浓缩的病毒样品。提纯的纯度标准包括物理均一性、病毒滴度与蛋白含量的比例、免疫学反应和结晶形成。提纯的主要依据和条件包括病毒在活细胞内寄生、复制和增殖的特性以及病毒粒子作为大蛋白颗粒的特性。提纯方法包括:1沉淀法:如中性盐、聚乙二醇、有机溶剂、等电点、皂土和鱼精蛋白沉淀法。2层析法:利用病毒粒子表面电荷进行正吸附或负吸附包括萄聚糖柱、凝胶、离子交换纤维素柱和亲和层析法。3两相溶剂间分配系数法:利用高分子物质在两相溶剂中的分配系数不同进行纯化。4红细胞吸附法:通过病毒与红细胞表面粘蛋白的吸附现象进行提纯。5电泳法:根据病毒粒子携带的电荷在电场中的移动进行提纯。6超速离心法:包括差速离心、速度区带离心和平衡密度梯度离心法用于分离不同大小的病毒粒子。7超滤法:利用超滤膜浓缩病毒样品具有操作简便、对产物损害小的优点。此外还包括病毒蛋白亚单位的分离、病毒脂质的抽提和病毒糖类的提取以研究病毒的化学成分和遗传物质。
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