新生儿溶血病血清学检查标准操作规程

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临床输血质量管理体系技术性规程

文件名称：新生儿溶血病血清学检查标准操作规程文件编号： HZYY-CBT/SOP 001

持有部门：输血科医务科护理部妇产科儿科

制订者：××× ××× 审核者：××× 核准者：×××

制订日期：××年××月××日审核日期：××年××月××日核准日期：××年××月××日

执行日期：××年××月××日版本/修改状态：A/0 文件页数:共 6 页

文件性质： □普通 □限制（仅限本院范围，未经授权）

新生儿溶血病是由母婴血型不合引起，可见于 ABO、Rh 及MN 等血型系统。胎儿和

新生儿红细胞被来自母亲的 IgG 抗体包被，并在婴儿的单核-巨噬细胞系统受到免疫性破坏，

出现溶血，表现出相应的症状。病情严重程度因个体差异、抗体类型、抗体效价等不同而

异。

1目的规范新生儿溶血病血清学检查操作；查找新生儿溶血病发生的原因，协助临床进

行实验室诊断及治疗；保证临床用血的安全性及有效性。

2适用范围母婴血型不合引起的新生儿溶血病的血标本。

3职责输血科(血库)技术人员负责新生儿溶血病血清学检查。

4原理通过检测新生儿血浆中是否存在来自母体并与新生儿红细胞血型抗原不相容的

IgG 类红细胞血型抗体，直接抗人球蛋白试验证实新生儿红细胞是否被致敏，放散试验证

实新生儿红细胞是否能解离出来自母体的红细胞血型抗体，根据以上三项试验结果综合诊

断新生儿溶血病。

5设备与材料

5.1 材料单克隆抗-A、抗-B、抗-D 定型试剂、多特异性抗球蛋白试剂或微柱凝胶抗

球蛋白卡、A、B、O型试剂红细胞、筛选细胞、谱细胞、生理盐水、小试管、

滴管、小玻棒、新生儿静脉血、产妇及患儿父亲血标本。

5.2 设备普通离心机、血型血清学专用离心机、电热恒温水浴箱、水浴振荡仪、普

通显微镜。

6检测环境室温应控制在 18-27℃，湿度应控制在 30%-70%。

7操作步骤

7.1 血标本采集及处理

7.1.1 采集患儿父母的血标本

采集患儿父母的血标本各 3～5ml，分离出血清，配制 3%～5%红细胞盐水悬液。

7.1.2 采集患儿血标本

7.1.2.1 采集患儿静脉血 3-4ml，EDTA-K2抗凝，离心分离出血浆及红细胞，

取压积红细胞 30-50μl，加生理盐水 1ml 配制成 3%-5%的红细胞悬液。

7.1.2.2 如果患儿血标本为不抗凝血，则在一小玻璃漏斗颈部置一适当大小的

棉球，把血块倒在棉球上，一边加生理盐水，一边用玻棒挤压血块，

收集漏斗下的红细胞悬液。

7.2 患儿血标本

7.2.1 血型鉴定

具体操作执行《ABO 和Rh（D）血型鉴定标准操作规程》。ABO 血型测定一般只做

正定型。

7.2.2 直接抗球蛋白试验

具体操作执行《抗球蛋白试验标准操作规程》中的直接抗球蛋白试验部分。

7.2.3 游离抗体检查：

7.2.3.1 取小试管 3支，分别标明A、B、O细胞，每管加患儿血清 2滴，再

分别加入3%～5%的A、B、O反定型试剂红细胞悬液 1滴。

7.2.3.2 37℃致敏 1h 后取出，若已发生凝集，不必继续往下做。

7.2.3.3 若不凝集，用盐水充分洗涤 3次反应物后加入抗人球蛋白溶液 1滴。

1300g 离心 15s，轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集反应，记录结果。若

肉眼不见凝集，以显微镜检查。按表1分析结果。

7.2.3.4 或从以上已加入受检血浆（或放散液）和相应试剂红细胞，并混匀的

反应试管中各取 50μl 分别加入已标记的微柱凝胶抗球蛋白卡各微孔

中，采用微柱凝胶抗人球蛋白卡间接抗球蛋白试验，具体操作执行

《微柱凝胶试验标准操作规程》。

表 1 患儿血清中游离抗体检查结果意义

指示红细胞

意义

Ac Bc Oc

+ - - 游离的抗-A

- + - 游离的抗-B

+ + - 游离的抗-A、抗-B 或者抗-AB

± ± + 游离的 ABO 系统以外抗体

- - - 无游离抗体

7.2.4 放散试验

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临床输血质量管理体系技术性规程文件名称：新生儿溶血病血清学检查标准操作规程文件编号：HZYY-CBT/SOP001持有部门：输血科医务科护理部妇产科儿科制订者：××××××审核者：×××核准者：×××制订日期：××年××月××日审核日期：××年××月××日核准日期：××年××月××日执行日期：××年××月××日版本/修改状态：A/0文件页数:共6页文件性质：□普通□限制（仅限本院范围，未经授权）新生儿溶血病是由母婴血型不合引起，可见于ABO、Rh及MN等血型系统。胎儿和新生儿红细胞被来自母亲的IgG抗体包被，并在婴儿的单核-巨噬细胞系统受到免疫性破坏，出现溶血，表现出相应的症状。病情严重程度因...

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